በ28°ሴ ለ25 ቀናት የማይንቀሳቀስ ኢንኩቤሽን ከተደረገ በኋላ፣ ከ*ፕሌሮተስ ኦስትሬተስ* NRC620 የተገኘው ላኬዝ በፈንገስ ባህል መካከለኛ ውስጥ ከፍተኛውን እንቅስቃሴ አሳይቷል። ለዚህ ኢንዛይም ተስማሚው የፒኤች እና የሙቀት መጠን በቅደም ተከተል 3.0 እና 70°ሴ ነበር። ለ2 ሰዓታት ኢንኩቤሽን በ40°ሴ እና 50°ሴ ከተደረገ በኋላ የኢንዛይም እንቅስቃሴ በቅደም ተከተል 68.33% እና 59.61% ሆኖ ቆይቷል። በሲትሬት-ፎስፌት ቋት (pH 7.0) ውስጥ ለ2 ሰዓታት ኢንኩቤሽን ከተደረገ በኋላ የኢንዛይም እንቅስቃሴ በ100% ቀጥሏል። 10 mM MgSO₄ እና CuSO₄ መጨመር የኢንዛይም እንቅስቃሴን በግምት በ21% እና 35% በቅደም ተከተል ጨምሯል፣ NaCl፣ MnCl₂፣ KCl እና CaCl₂ የኢንዛይም እንቅስቃሴን አግደዋል። ABTSን እንደ ንጣፍ በመጠቀም፣ የ*Pleurotus ostreatus* NRC 620 lacase የኪነቲክ መለኪያዎች (Km እና Vmax) በቅደም ተከተል 1.99 mM እና 16,217 μmol ደቂቃ−1 L−1 ነበሩ። የፖም ጭማቂ ናሙናዎች ኢንዛይማቲክ ሕክምና የፒኤች እና የviscosity መጠንን በእጅጉ ቀንሷል፣ እና ይህ ቅነሳ ከማከማቻ ጊዜ መጨመር ጋር ተዛማጅነት አለው። የላኬዝ ሕክምና የፖም ጭማቂ አጠቃላይ የፊኖሊክ ይዘት በትንሹ እንዲቀንስ አድርጓል፣ ነገር ግን የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ መቀነስ አልታየም።
በቅርብ ዓመታት ውስጥ ተመራማሪዎች በምግብ ኢንዱስትሪ ውስጥ አረንጓዴ ባዮቴክኖሎጂን ተግባራዊ ለማድረግ ትኩረት ሰጥተዋል። ላኬዝ በምግብ ኢንዱስትሪ ውስጥ በጣም ጠቃሚ ከሆኑ ኢንዛይሞች አንዱ ሲሆን እንደ ጭማቂ ማቀነባበሪያ፣ መጋገር፣ የወይን ማረጋጋት እና የምግብ ምርቶችን የኦርጋኖሌፕቲክ ባህሪያትን ማሻሻል ባሉ ዘርፎች አፕሊኬሽኖችን ያገኛል።1ብዙ ከፍተኛ እፅዋትና ረቂቅ ተሕዋስያን ላክሴስን ያመነጫሉ፤2እና እንደ ዱዩተሮሚሴቴስ፣ አስኮሚሴቴስ እና ባሲዲዮማይሴቴስ ያሉ ፈንገሶችም ላኬዝ ሊያመነጩ ይችላሉ።3ላኬዝ (EC 1.10.3.2) ሶስት የተለያዩ የመዳብ አቶሞችን የያዘ ስርዓት በመጠቀም ሞለኪውላዊ ኦክስጅንን ወደ ውሃ የሚቀንስ ሰማያዊ ኦክሲዳዝ ሲሆን በዚህም የተለያዩ የፊኖሊክ ውህዶችን እና አሮማቲክ አሚኖችን ኦክሳይድ ያደርጋል። የፍራፍሬ እና የአትክልት ጭማቂዎችን በማምረት ወቅት፣ ኢንዛይማቲክ እና ኤንዛይማቲክ ያልሆነ ቡናማ ቀለም ወሳኝ ጉዳዮች ናቸው።4እነዚህ ንጥረ ነገሮች የጭማቂውን ቀለም፣ ጣዕም እና መዓዛ አሉታዊ ተጽዕኖ ስለሚያሳድሩ መወገድ አለባቸው።5
ከሁሉም ፍራፍሬዎች ፖም በዓለም አቀፍ ደረጃ እና በአውሮፓ ህብረት ውስጥ በብዛት የሚበላ ነው። በ2019 የፖም ምርት በዓለም አቀፍ ደረጃ በሦስተኛ ደረጃ ላይ የሚገኝ ሲሆን ከ87 ሚሊዮን ቶን በላይ ሆኗል።6ፖም እንደ ካፌይክ አሲድ እና ክሎሮጂኒክ አሲድ ያሉ ፍላቮኖይዶችን እና ፌኖይሊክ አሲዶችን ጨምሮ በርካታ የፊኖይሊክ ውህዶችን ይዟል።7የፖም ጭማቂ በተለምዶ ግልጽ በሆነ መልኩ ስለሚጠጣ፣ በማጣሪያ ሂደቱ ወቅት ከ50% እስከ 90% የሚሆኑት የፊኖሊክ ክፍሎች ይጠፋሉ።8ዛሬ፣ ሸማቾች እንደ ደመናማ የፖም ጭማቂ ከፍተኛ የፖሊፊኖል ይዘት ያለው እና አነስተኛ መጠን ያለው የተቀነባበሩ ምርቶችን የመምረጥ ዝንባሌ አላቸው። ሆኖም፣ ከፍተኛ የፊኖሊክ ይዘት ስላለው፣ ይህ ዓይነቱ የፖም ጭማቂ በተለይ ለቀለም ለውጥ እና ለጨለማ ተጋላጭ ነው።9የፖም ጭማቂን ጨለማ ለመቀነስ ወይም ለመከላከል እንደ ፓስቸራይዝድ ያሉ የሙቀት ሕክምና ዘዴዎችን ጨምሮ የተለያዩ ቴክኖሎጂዎች ጥቅም ላይ ይውላሉ።10ሆኖም፣ በ Sauceda-Gálvez ጥናት መሰረት11የሙቀት ማቀነባበሪያ ተለዋዋጭ ኬሚካሎችን ሊያጠፋ እና የፖም ጭማቂን ኦርጋኖሌፕቲክ ባህሪያት ላይ ተጽዕኖ ሊያሳድር ይችላል። ለሙቀት ማቀነባበሪያ ዘዴዎች አማራጭ የሆኑት ሱፐር ክሪቲካል ካርቦን ዳይኦክሳይድ፣ አልትራቫዮሌት ጨረር፣ አልትራሳውንድ፣ ከፍተኛ ሃይድሮስታቲክ ግፊት ወይም ከፍተኛ ግፊት ያለው ሆሞጋላይዜሽን ያካትታሉ።12የእነዚህ ቴክኖሎጂዎች ውጤታማነት እና ተስማሚ የፍራፍሬ ጭማቂዎች ምርት የሚወሰነው ጥቅም ላይ በሚውሉት መለኪያዎች እና በምርት ባህሪያት ላይ ነው። ሰፊ አጠቃቀማቸው በከፍተኛ ወጪዎች፣ በአንዳንድ የምግብ ምርቶች ጥራት ላይ በሚያሳድሩት አሉታዊ ተጽዕኖ ወይም በቂ ያልሆነ የኢንዛይም እንቅስቃሴ በመገደብ የተገደበ ነው።13,14
ላክስ የፍራፍሬ ጭማቂን ለማረጋጋት እና ለማጥራት ሊያገለግል ይችላል።15ጎክመን እና ሌሎችም።16የፍራፍሬ ጭማቂን ለማጣራት ላኬዝ እንዲጠቀሙ ይመክራሉ ምክንያቱም የፊኖሊክ ውህዶችን ውጤታማ በሆነ መንገድ ያስወግዳል ምክንያቱም በማንኛውም የአልትራፊልትሬሽን ሽፋን በቀላሉ የሚወገዱ ፖሊመሮች ወይም ኦሊጎመሮች በመቀየር የፖም ጭማቂ እስከ 50°ሴ ድረስ የተረጋጋ ቀለም እና ግልጽነት እንዲቆይ ያስችለዋል። የተጣራ *ትሪኮደርማ* ላኬዝ በአልሙና ዶቃዎች ላይ እንቅስቃሴ አልባ ሆኖ በአፕል ጭማቂ ማይክሮባላዊ ብክለት ምክንያት የሚመጡ ጣዕም የሌላቸውን ውህዶች በምርጫ ለማስወገድ ጥቅም ላይ ውሏል።17
ከፖም ጭማቂ ውስጥ ከ80-90% የሚሆኑት ተለዋዋጭ ንጥረ ነገሮች ኤስተር እና አልዲኢይድ ሲሆኑ፣ እነዚህም ጭማቂው ልዩ የሆነ መዓዛ ይሰጣሉ።18ከ *ትራሜትስ ቨርሲኮለር* የተሰራው ላኬዝ የፖም ጭማቂን ለማጣራት ከወጣት የኮኮናት ቅርፊቶች ከተፈጥሯዊ ፋይበር በተሰራ ርካሽ ድጋፍ ላይ ተንቀሳቅሷል።19ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች የፖም ጭማቂን (ቀለም እና ብጥብጥ) ማረጋጋት ኢንዛይም-ነጻ ወይም ኢሞቢላይዜሽን ዘዴዎችን በመጠቀም ወይም ከአልትራፊልትሬሽን ጋር በማጣመር መርምረዋል።5,19ይሁን እንጂ የፈንገስ ላክሶች በማከማቻ ጊዜ የፖም ጭማቂ ፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያት ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ ግልጽ አይደለም። ስለዚህ የዚህ ጥናት ዓላማ በፈንገስ ላክሶች እና ለሁለት ሳምንታት በማቀዝቀዣ ውስጥ ከታከመ በኋላ የፖም ጭማቂ የፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያት፣ የፊዚኮሊክ ውህድ ይዘት እና የፖም ጭማቂ አንቲኦክሲደንት እንቅስቃሴ ላይ በሙከራ መመርመር ነበር። ላክሶች የፊዚኮሊክ ውህዶችን የኦክሳይድ ችሎታ አላቸው፣ ይህም ጭማቂን ማጥራትን ጨምሮ በተለያዩ የኢንዱስትሪ ሂደቶች ውስጥ ጥቅም ላይ እንዲውሉ ተስፋ ሰጪ ያደርጋቸዋል። ይህ ጥናት ከ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ላካሶችን መርምሯል፣ ለእንቅስቃሴያቸው እና በጭማቂ ማጥራት ረገድ ውጤታማነታቸው ላይ በማተኮር። በኦይስተር እንጉዳዮች (P. ostreatus NRC 620) ላይ የተደረገው ጥናት አሁንም ውስን ቢሆንም፣ ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች እንደ Trametes versicolor እና Ganoderma lucidum ካሉ የተለያዩ የፈንገስ ምንጮች የተገኙ ኢንዛይሞችን መርምረዋል። የዚህ ጥናት ዓላማ የዚህ ኢንዛይም በምግብ ኢንዱስትሪ ውስጥ ያለውን እምቅ አተገባበር መገምገም እና ልዩ ባህሪያቱን፣ በተለይም ተስማሚውን የፒኤች እና የሙቀት መጠን ማጉላት ነበር።
2,2′-አዞኦክሲቢስ (3-ኤቲልቤንዞቲያዞሊን-6-ሰልፎኒክ አሲድ) (ABTS) የተገዛው ከሲግማ-አልድሪች (ካናዳ) ነው። ሌሎች ሁሉም ሬጀንቶች የትንታኔ ደረጃ ያላቸው ነበሩ።
የብሔራዊ የምርምር ማዕከል የማይክሮቢያል ባህል ስብስብ ማዕከል የሚታወቀውን የኦይስተር እንጉዳይ ዝርያ NRC620 አግኝቷል። ከንዑስ እርሻ በኋላ፣ ይህ ዝርያ በ4°ሴ ባለው የድንች ዴክስትሮዝ አጋር ዘንጎች ላይ ተከማችቷል። የኢኖኩለም ዝግጅት ዘዴ እንደሚከተለው ነበር፡- የ10 ቀን ዕድሜ ያለው፣ ሙሉ በሙሉ የዳበረ ማይሴሊየም በድንች ዴክስትሮዝ አጋር ሳህኖች ላይ ተከተበ እና በ28°ሴ እንዲቆይ ተደርጓል። ከ10 ቀናት በኋላ፣ ሶስት 12 ሚሜ ዲያሜትር ያላቸው ማይሴሊያል ብሎኮች ከአልጋ ሚዲያው በጸዳ የብረት ፓንች ተወግደው በ250 ሚሊ ሊትር የኤርለንሜየር ብልቃጦች ውስጥ በኦትማን እና ሌሎች ቀደም ሲል እንደተገለፀው 50 ሚሊ ሊትር የጸዳ የባህል መካከለኛ (pH 5.0) የያዙ የጥጥ መሰኪያዎች ተቀምጠዋል።20) ባህሎቹ በ28°ሴ ለ18 ቀናት እንዲቀቡ ተደርገዋል። ከዚያም ባህሎቹ በዋትማን ቁጥር 1 የማጣሪያ ወረቀት ተጣርተው ውጤቱም እንደ ኢንዛይም ምንጭ ሆኖ አገልግሏል።
የላክሴዝ እንቅስቃሴ የሚወሰነው እንደ ABTS በመጠቀም ነው። የምላሽ ቅይጥ (2 ሚሊ ሊትር) 500 μL የ0.3 mM ABTS (በ0.1 M ሶዲየም ሲትሬት ቋት፣ pH 4.5 ውስጥ የሟሟ) እና የሚፈለገውን የኢንዛይም ናሙና በተጣራ ውሃ የተሟሟት ይዟል።21,22ላኬዝ በክፍል ሙቀት (28°ሴ ± 2) ABTS ኦክሳይድ ሊያደርግ እንደሚችል ከግምት ውስጥ በማስገባት፣ ABTS ኦክሳይድ የሚወሰነው በ420 nm (ε) የመምጠጥ መጨመርን በመለካት ነው።420= 36,000 ሴ.ሜ-1 M -1) አጊለንት ካርይ-100 UV ስፔክትሮፎቶሜትር በመጠቀም። በደቂቃ 1 μmol ABTS ኦክሳይድ ለማድረግ አንድ የላኬዝ እንቅስቃሴ አሃድ ያስፈልጋል። የፕሮቲን ክምችት የሚወሰነው በብራድፎርድ ዘዴ ሲሆን የከብት ሴረም አልቡሚንን እንደ ውስጣዊ መቆጣጠሪያ በመጠቀም ነው።23,24
ከኦይስተር እንጉዳይ ዝርያ NRC 620 ኢንዛይሙን ካገኘ በኋላ፣ እንቅስቃሴው በ28 ዲግሪ ሴልሺየስ ባለው የማይለዋወጥ ሁኔታ ውስጥ ለ25 ቀናት በተለያዩ የእርሻ ጊዜያት ተለካ።
የሙቀት መጠን በላክሴዝ እንቅስቃሴ ላይ ያለውን ተጽእኖ ለማጥናት፣ ሙከራዎች ከ20 እስከ 90 ዲግሪ ሴልሺየስ ባለው የሙቀት ክልል ውስጥ ተካሂደዋል። ኢንዛይሙን ከመጨመራቸው እና ምላሹን ከመጀመራቸው በፊት፣ ቋት (0.1 ሜ ሶዲየም ሲትሬት፣ pH 4.5) እና ንጣፎች (ABTS) በተለያዩ የሙቀት መጠኖች ለ5 ደቂቃዎች ተቀላቅለው እንዲቆዩ ተደርገዋል። የኢንዛይም የሙቀት መረጋጋት በ0.05 ሜ ሶዲየም ፎስፌት ቋት (pH 7.0) ውስጥ ለ2 ሰዓታት በቅደም ተከተል ተገምግሟል። ከዚያም የቀረው እንቅስቃሴ በABTS ንጣፍ በመጠቀም ተገምግሟል።
የፒኤች መጠን በላክሴስ እንቅስቃሴ ላይ የሚያሳድረው ተጽእኖ በ0.1 M ሲትሬት-ፎስፌት ቋቶች ውስጥ ከ2.5 እስከ 7.0 ባለው የፒኤች ክልል ውስጥ ABTSን እንደ ንጣፍ በመጠቀም ተገምግሟል። የኢንዛይም መፍትሄው በ40°ሴ ለሁለት ሰዓታት በ0.1 M ሲትሬት እና ትሪስ ቋቶች (pH 3፣ 4፣ 6 እና 7) ውስጥ እንዲቆይ ተደርጓል። የኤቢቲኤስ መጠን እንደ ንጣፍ ከተተከለ በኋላ የተሰላው ቀሪ እንቅስቃሴ ነው።
ላክሱ ለ10 ደቂቃ በሶዲየም ፎስፌት ቋት (0.05 M፣ pH 7.0) ውስጥ የተለያዩ የብረት አየኖችን (Mg2+፣ Cu2+፣ Co2+፣ Ca2+፣ Zn2+፣ K+፣ Na+ እና Mn2+) በቅደም ተከተል በ2.5 mM እና 10 mM ክምችት ውስጥ እንዲቆይ ተደርጓል። ከዚያም ምላሹን ለመጀመር ንዑሱ (ABTS) ተጨምሮ አንጻራዊ እንቅስቃሴው ተገምግሟል።
የ ABTS ኦክሳይድ በተለያዩ ክምችቶች (0.025–3 mM) በ pH 4.5 ተለክቷል ይህም የኪኔቲክ መለኪያዎችን (Vmax እና Km) ለመወሰን ነው።ቋሚዎችየሚካኤሊስ-ሜንተን እኩልታ የተሰላው የLineweaver-Burk ሴራ በመጠቀም ሲሆን ይህም የምላሽ ፍጥነቱን ተገላቢጦሽ እንደ የንዑስ ክፍል ክምችት ያስቀምጣል። የኪነቲክ ቋሚዎች የተሰሉት ከLineweaver-Burk ሴራ ሲሆን የGraphPad Prism ስሪት 6.01 ሶፍትዌርን በመጠቀም ነው።
ፖምቹን በቧንቧ ውሃ በደንብ ካጠቡ በኋላ፣ በግማሽ ተቆርጠው ሙሉ በሙሉ አውቶማቲክ በሆነ የብራውን ኤምፒ80 የፖም ጭማቂ (በጀርመን የተሰራ) ጭማቂ ተጨምረዋል። ጭማቂው በአራት የቺዝ ክሎዝ ንብርብሮች ተጣርቶ ነበር። ወደ መቆጣጠሪያ ቡድኑ ምንም ኢንዛይሞች አልተጨመሩም፣ 2.0% ላክዝ (በጣም ውጤታማ የሆነው ክምችት የተፈተነው) ደግሞ አዲስ በተዘጋጀው የፖም ጭማቂ ላይ ተጨምሮ ለሁለት ሳምንታት በ4°ሴ የሙቀት መጠን ተከማችቷል።
ቲትራቤብል አሲድነት (TA) እና ፒኤች የሚወሰኑት በቦልተን እና በፒኤች ዘዴ መሠረት ነው።አል.27የእያንዳንዱ ናሙና የፒኤች መጠን የተለካው በዲጂታል ፒኤች ሜትር (ጄንዌይ 3510 ፒኤች ሜትር) በመጠቀም ነው። ቲትራቤብል አሲድነት (TA) በሚከተለው ቀመር በመጠቀም በማሊክ አሲድ ላይ ተመስርቶ ተሰላ።
V እና C በቅደም ተከተል በቲትራቴሽን ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለው የሶዲየም ሃይድሮክሳይድ መፍትሄ መጠን (mL) እና ክምችት (0.1 mol/L) ሲሆኑ። K ከ0.067 ጋር እኩል የሆነ የማሊክ አሲድ ልወጣ ኮፊሸንት ሲሆን W ደግሞ የፖም ጭማቂ ክብደት (g) ነው።
አጠቃላይ የሚሟሟ ጠጣር ንጥረ ነገሮች (ቲዲኤስ) የሁሉም ጭማቂ ናሙናዎች ይዘት የሚወሰነው በPAL-1 የኪስ ሪፍራክቶሜትር (ATAGO፣ ቶኪዮ፣ ጃፓን) በመጠቀም ነው። ከእያንዳንዱ መለኪያ በኋላ የኦፕቲካል ሌንስ በዲአዮናይዝድ ውሃ ታጥቧል፣ እና እያንዳንዱ የፖም ጭማቂ ናሙና ሶስት ጊዜ ተፈትኗል። የእያንዳንዱ ናሙና እሴት የተሰላው ሦስቱን መለኪያዎች በአማካይ በማድረግ ነው። ለእያንዳንዱ የፖም ጭማቂ ናሙና አማካይ ± መደበኛ መዛባትም እነዚህን ውጤቶች በአማካይ በማድረግ ተሰልቷል።
የፖም ጭማቂ ናሙናዎች ቫይስኮላስቲክነት የተገመገመው በሚሽከረከር ቪስኮሜትር (RV፣ Rheotest 2፣ ጀርመን) ነው። ናሙናው በቪስኮሜትር "S2" ሲሊንደር ውስጥ ተቀምጧል። የሚታየው ቫይስኮስቲክስ የተወከለው በሼር ውጥረት እና በሼር ፍጥነት ኩርባ ቁልቁለት ሲሆን ይህም ከተዛማጅ ኩርባዎች እና ከተለያዩ የመቁረጥ መጠኖች (ከ1.00 እስከ 437.4 ሰከንድ⁻¹) የተሰላ ነው። የሚታየውን ቫይስኮስቲክስ ለማስላት ቀመር እንደሚከተለው ነው፡
η ግልጽ የሆነ viscosity (cP) ሲሆን፣ τ የሸር ውጥረት (dyn/cm²) ነው፣ γ የሸር ፍጥነት (sec⁻¹) ነው፣ እና (τ) የሚሰላው በሚከተለው ቀመር በመጠቀም የጉልበት (α) እና የሲሊንደር (Z) እሴቶችን በመጠቀም ነው፡ τ = Z . α።
የብራውንዲንግ ኢንዴክስ የሚወሰነው በሜይዳቭ እና ዘዴ መሰረት ነውአል.29. የ10 ሚሊ ሊትር ጭማቂ ናሙና በ2750 xg ለ10 ደቂቃ በሴንትሪፉጅ ተለክቷል። 5 ሚሊ ሊትር የጭማቂው ሱፐርናታንት ከ5 ሚሊ ሊትር 95% ኤታኖል ጋር ተቀላቅሏል። የድብልቁን የመምጠጥ አቅም በ420 nm በሺማድዙ UV ስፔክትሮፎቶሜትር (UV-1601 ፒሲ) በመጠቀም ተለክቷል።
ጠቅላላ የፊኖሊክ ይዘት (TPC) በቦልተን እና ሌሎች እንደገለጹት የፎሊን-ሲዮካልቴው ሪአጀንት በመጠቀም በቀለም መለኪያ ተወስኗል።[27]] ከ0 እስከ 500 ሚ.ግ./ሊ (በግምት 100 ሚ.ግ./ሊ) ባለው ክምችት መሰረት የጋሊክ አሲድ መደበኛ ኩርባ ተገንብቷል።ሩብ= 0.997)። ውጤቶቹ የሚገለጹት እንደ ጋሊክ አሲድ አቻዎች (mg GAE/mL) ነው።
125 μL የተጣራ ውሃ እና 2850 μL የFRAP መፍትሄ በ25 μL የፖም ጭማቂ ውስጥ ይጨምሩ እና ድብልቁን በጨለማ ውስጥ ይተዉት30ደቂቃ። ከዚያም በ593 nm ውስጥ ያለውን የመምጠጥ አቅም በሺማድዙ UV ስፔክትሮፎቶሜትር (UV-1601 ፒሲ) ይለኩ። የFRAP ሪአክተር የተዘጋጀው 300 mM አሲቴት ቋት (pH 3.6)፣ 20 mM ብረት (III) ክሎራይድ እና 10 mM 2,4,6-ትሪስ(2-ፒሪዲል)ትሪዛይን (TPTZ) (በ40 mM HCl ውስጥ የሟሟ) በ10:1:1 ጥምርታ በማዋሃድ ነው። ትሮሎክስን እንደ መደበኛ በመጠቀም መደበኛ ኩርባ ተፈጠረ (ሩብ²= 0.999)፣ እና ውጤቶቹ እንደ μM Trolox/mL ይገለጻሉ።
የታከሙትና ያልተታከሙ ጭማቂዎች የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ የሚወሰነው የዲፒኤች ፍሪ ራዲካልስን የመሰብሰብ ችሎታቸውን ለመገምገም የዲፒኤች ዘዴን በመጠቀም ነው።31አስር ማይክሮሊተርስ ጭማቂ በሜታኖል ውስጥ ከ1 ሚሊ ሊትር የዲፒኤች መፍትሄ (100 μM) ጋር ተቀላቅሏል። ለ30 ደቂቃዎች በጨለማ ውስጥ ምላሽ ከሰጠ በኋላ የድብልቁን የመምጠጥ አቅም በ517 nm በሺማድዙ UV ስፔክትሮፎቶሜትር (UV-1601 ፒሲ) በመጠቀም ተለክቷል። ውጤቶቹ በካሊብሬሽን ኩርባ ላይ በመመስረት እንደ ትሮሎክስ አቻዎች (μM trolox/ml) ተገልጸዋል (R2= 0.990)።
የተገኘው መረጃ እንደሚያሳየው በ18ኛው ቀን የመፍላት ቀን መጨረሻ ላይ በNRC 620 ኦይስተር እንጉዳዮች ውስጥ ከፍተኛው የላኬዝ ምርት ታይቷል፣ ይህም 1302 U/L እንቅስቃሴ ላይ ደርሷል። ይህም ለላኬዝ ምርት ተስማሚ የሆነ የእርሻ ጊዜን ለመወሰን መሰረት ሆኖ አገልግሏል (ምስል 1)። የኢንዛይም ምርት እየጨመረ በሄደ ቁጥር የእርሻ ጊዜ ቢጨምርም፣ የጨመረው መጠን ከእርሻ ጊዜ ጋር በቀጥታ ተመጣጣኝ አልነበረም፤ ከ21 ቀናት በኋላ የኢንዛይም እንቅስቃሴ በ90 U/L (ወደ 1390 U/L) ብቻ ጨምሯል። ስለዚህ፣ የምርት ምርትን ከጨመረው የእርሻ ጊዜ ኢኮኖሚያዊ ጥቅሞች ጋር ለማመጣጠን 18 ቀናት በመጨረሻ እንደ ምርጥ የእርሻ ጊዜ ተመርጠዋል።
በፕሌሮተስ ኦስትሬተስ NRC 620 ውስጥ የእርሻ ጊዜ በላክሴስ ምርት ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ። ሶስት (12 ሚሜ) የፈንገስ ማይሴሊያል ብሎኮች በ50 ሚሊ ሊትር ንፁህ መካከለኛ ውስጥ ተከተቡ እና ከዚያም በ28 ዲግሪ ሴልሺየስ ለተለያዩ ጊዜያት ተክለዋል።
ከሌሎች ጥናቶች ጋር በሚስማማ መልኩ፣ ውጤቶቻችን እንደሚያሳዩት በፈንገስ አማካኝነት ከፍተኛ የላክሴስ ፈሳሽ ለማግኘት ተስማሚው የመራቢያ ጊዜ ከ7 እስከ 36 ቀናት ውስጥ ሊሆን ይችላል።32እንደ ኢዚኬ እና ሌሎች ገለጻ።33, *ትራሜትስ ፖሊዞና* WRF03 በዘጠነኛው ቀን መፍላት መጨረሻ ላይ ከፍተኛውን የላኬዝ መጠን ያመነጨ ሲሆን ይህም የተወሰነ የ1637 ዩ/ሚግ ፕሮቲን እንቅስቃሴ አለው። በተጨማሪም ኦትማን እና ሌሎችም።34*ትሪኮደርማ ሃርዚአነም* S7113 በአምስተኛው የባህላዊ ቀን ከፍተኛ መጠን ያለው ላኬዝ እንዳወጣ አረጋግጧል። የላኬዝ ምርት መጠን በአስራ አራተኛው ቀን ከፍተኛ እንቅስቃሴ ላይ ደርሶ ቀስ በቀስ እየቀነሰ ሄደ።34ምንም እንኳን የኢንዛይም ፈሳሽ በዋናው የእድገት ደረጃ ላይ ሊከሰት ቢችልም፣ ብዙውን ጊዜ በመካከለኛው ደረጃ ላይ ከፍተኛ ደረጃ ላይ ይደርሳል እና የካርቦን ወይም የናይትሮጅን ምንጭ በመብላት ምክንያት ይከሰታል።34,35
ምንም እንኳን ከፕሌሮተስ ኦስትሬተስ NRC 620 የሚገኘው ላኬዝ ከ50°ሴ እስከ 80°ሴ ባለው ሰፊ የሙቀት ክልል ውስጥ ከፍተኛ እንቅስቃሴን ቢያሳይም፣ ከፍተኛው እንቅስቃሴው በ70°ሴ ታይቷል (ምስል 2ሀ)። ከዚህ የሙቀት ክልል ውጭ የኢንዛይም እንቅስቃሴ በግምት በ70°ሴ ቀንሷል። እነዚህ ውጤቶች ኢንዛይሙ በከፍተኛ ሙቀት ውስጥ ንቁ መሆኑን ይጠቁማሉ፣ ምናልባትም ከፍተኛ ሙቀት የምላሹን ኪኔቲክ ኃይል ስለሚጨምር።
በ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ውስጥ ባለው የላኬዝ እንቅስቃሴ ላይ የምላሽ ሙቀት (a) እና pH (b) ተጽእኖ። ከ20 እስከ 90 °C የሚደርሱ የሙቀት መጠኖች የተፈጠሩት ኢንዛይሙን ከመጨመራቸው እና ምላሹን ከመጀመራቸው በፊት ድብልቁን በተለያዩ የሙቀት መጠኖች ለ5 ደቂቃዎች ቀድመው በማቅለጥ ነው። የፒኤች በላኬዝ እንቅስቃሴ ላይ ያለው ተጽእኖ ከ2.5 እስከ 7.0 ባለው የፒኤች ክልል ውስጥ 0.1 M ሲትሬት-ፎስፌት ቋት በያዙ መፍትሄዎች ውስጥ እንደ ንጣፍ ABTS በመጠቀም ተገምግሟል።
እንደ ኢዚኬ እና እንደገለጹትአል.33ለ *Trametes polyzona* WRF03 laccase ተስማሚው የሙቀት መጠን 55°ሴ ሲሆን ይህም ለ *Ganoderma lucidum* ካለው ጋር ተመሳሳይ ነው።laccase36እና ለ *Trametes polyzona* KU-RNW02737 ተስማሚ የሙቀት መጠን (50°ሴ) ጋር ተመሳሳይ ነው።ላኬዝ . ባልድሪያን38እንደሌሎች የሊግኒን-ዲግሬዲንግ ኢንዛይም ስርዓቶች፣ ለላኬዝ ተስማሚ የሙቀት መጠን ከ50 እስከ 70 ዲግሪ ሴልሺየስ መሆኑን ልብ ይሏል።
ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት ኢንዛይሙ በፒኤች 3.0 ከፍተኛውን እንቅስቃሴ ያሳየ ሲሆን በፒኤች 3.5 94% እንቅስቃሴ ደርሷል። ሆኖም ግን፣ ከ2.5 እስከ 7.0 ባለው ሰፊ የፒኤች ክልል ውስጥ ንቁ ሆኖ ቀጥሏል (ምስል 2ለ)። ከዚህም በላይ፣ ከገለልተኛ ወይም ከአልካላይን ሁኔታዎች ጋር ሲነጻጸር በአሲድማ ሁኔታዎች ውስጥ ከፍተኛ እንቅስቃሴ አሳይቷል። እንቅስቃሴው ከ2.5 እስከ 4.5 ባለው የፒኤች ክልል ውስጥ ቢያንስ 77% ሆኖ ቆይቷል፣ ነገር ግን በፒኤች 7.0 በግምት 38% ብቻ ደርሷል። ከ *ትራሜቴስ ፖሊዞና* WRF03 ለላኬዝ ተስማሚው ፒኤች 4.533 ነበር፣ ይህም ከ *ትራሜቴስ ፖሊዞና* KU-RNW02737፣ *ትሪኮደርማ ሃርዛኒየም* 39፣ *ፕሌሮተስ* sp. 40 እና *ትራሜቴስ ሂርሱታ* 41 ላኬዝስ ጋር ተመሳሳይ ነው። ሆኖም፣ በቻይሪን እና ባልደረቦቻቸው ጥናት መሠረት።42, ከ *ፖሊሞርፋ f. sp.* WR710-1 ለላኬዝ ተስማሚው ፒኤች 2.2 ሲሆን ከ *ፖሊሞርፋ f. sp.* ለላኬዝ ተስማሚው ፒኤች ደግሞ IBL-04 5.043 ነው። የሃይድሮክሳይድ አኒየኖች (ላኬዝ አጋቾች) ከT2/T3 ላክሴዝ የመዳብ አቶሞች ጋር መተሳሰር በገለልተኛ ወይም በአልካላይን ፒኤች ሁኔታዎች ውስጥ የላኬዝ እንቅስቃሴ እንዲቀንስ ምክንያት ሊሆን ይችላል። ይህ ከT1 ማእከል ወደ T2/T3 ማዕከል ውስጣዊ የኤሌክትሮን ዝውውርን ሊያስተጓጉል ይችላል፣ በዚህምገደብየኢንዛይም እንቅስቃሴ 23,44
ኢንዛይሙን በተለያዩ የሙቀት መጠኖች በማሳደግ፣ የመታቀፊያ ጊዜም ሆነ የሙቀት መጠን የኢንዛይም መረጋጋትን እንደነኩ ተረጋግጧል። በተለይም፣ ከ*ትራሜትስ ፖሊዞና* NRC 620 የተገኘው ላኬዝ በ40℃ እና 50℃ ከፍተኛ መረጋጋት አሳይቷል፣ ከ120 ደቂቃዎች በኋላ በቅደም ተከተል የመጀመሪያውን እንቅስቃሴ 68.33% እና 59.61% ይይዛል (ምስል 3a)። በተቃራኒው፣ በተመሳሳይ ሁኔታዎች (40℃ እና 50℃፣ 120 ደቂቃዎች)፣ ከ*ትራሜትስ ፖሊዞና* WRF03 የተገኘው ላኬዝ በቅደም ተከተል 64.38% እና 42.92% የእንቅስቃሴውን ይይዛል።33በተቃራኒው፣ የመታቀፉን ጊዜ እና የሙቀት መጠን መጨመር የ*ትራሜትስ ፖሊዞና* NRC 620 ላክሴስ መረጋጋትን ቀንሷል፤ በ60℃ እና 70℃ ለ60 ደቂቃዎች ከተተከለ በኋላ እንቅስቃሴው በቅደም ተከተል ወደ 39.24% እና 1.72% ቀንሷል (ምስል 3a)። ከሙከራ ውጤቶቹ ጋር በሚስማማ መልኩ፣ ከ*ትራሜትስ ፖሊዞና* WRF03 የተገኘው ላኬዝ በሙቀት ሕክምና ሂደቱ በሙሉ በ40 እና 50℃ ከፍተኛ መረጋጋት አሳይቷል።33በተመሳሳይ፣ ሉዋንግጃሮኤንኪት እናአል.37እና ቻይሪን እናአል.42ላክሴስ ከትራሜትስ ፖሊዞና KURNW027 እና ከትራሜትስ ፖሊዞና WR710-1 የተገኙ የላካሴስ መረጋጋትን ለ1 ሰዓት በቅደም ተከተል ዘግቧል። በተለያዩ የባዮቴክኖሎጂ መስኮች ላይ ተግባራዊ የሚሆን ጠቃሚ ባዮካታሊስት እንደመሆኑ መጠን፣ ላክሴስ ሰፊ የሙቀት ክልል ውስጥ ጥሩ መረጋጋት እና አፈጻጸም ሊኖረው ይገባል።
ከ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 የሚገኘው የላኬዝ ቴርሞስታቲክ መረጋጋት (a) እና የፒኤች መረጋጋት (b)። የቴርሞስታቲክ መረጋጋት የተገመገመው በ0.05 M ሶዲየም ፎስፌት ቋት (pH 7.0) ውስጥ ለ2 ሰዓታት በቅደም ተከተል በ40፣ 50፣ 60 እና 70 °C ውስጥ የኢንዛይም መፍትሄን በማቀነባበር ነው። የፒኤች መረጋጋት የተገመገመው በ0.1 M citrate ቋት እና በTris ቋት (pH 3፣ 4፣ 6 እና 7) ውስጥ የኢንዛይም መፍትሄን ለ2 ሰዓታት በ40 °C ውስጥ በማቀነባበር ነው። የቀረው እንቅስቃሴ ከተቀነባበረ በኋላ ABTSን እንደ ንጣፍ በመጠቀም ተሰልቷል።
የኢንዛይም አጠቃቀም እና ማከማቻ ተስማሚ ሁኔታዎችን ለመወሰን፣ የፒኤች መጠን በላክሴስ መረጋጋት ላይ ያለውን ተጽእኖ መርምረናል። ለተለያዩ የፒኤች እሴቶች መጋለጥ የፕሮቲን አወቃቀሩን መረጋጋት በእጅጉ ነክቷል፣ በዚህም የኢንዛይም ሞለኪውል መረጋጋት እና እንቅስቃሴ ላይ ተጽዕኖ አሳድሯል። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት ኢንዛይሙ በአሲድማ ሁኔታዎች ውስጥ ብዙም ያልተረጋጋ ነበር፣ ነገር ግን በከፍተኛ የፒኤች እሴቶች (ገለልተኛ እና አልካላይን ክልሎች) የተሻለ መረጋጋት አሳይቷል። በ7.0፣ 6.0፣ 4.0 እና 3.0 የፒኤች እሴቶች ላይ፣ ከ120 ደቂቃዎች በኋላ የኢንዛይም ማቆየት መጠኖች በቅደም ተከተል በግምት 100%፣ 62.54%፣ 52.39% እና 11.14% ነበሩ (ምስል 3ለ)። *ስትሮምበስ መልቲሰስ* WRF03 ላክሴስ በገለልተኛ የፒኤች እሴቶች (5.5-6.5) እና በአሲድማ ፒኤች እሴቶች (ከ4.0 በታች) ዝቅተኛ መረጋጋት አሳይቷል። በ5.5፣ 6.0 እና 6.5 የፒኤች እሴቶች ላይ ለ120 ደቂቃዎች ከቆዩ በኋላ የኢንዛይም ማቆየት መጠኖች በቅደም ተከተል በግምት 82%፣ 100% እና 93% ነበሩ።33ካይሪን እና ሌሎችም።42ከትራሜትስ ፖሊዞና WR710-1 የተገኘው ላኬዝ ከ6.0 እስከ 7.0 ባለው የፒኤች ክልል ውስጥ የተረጋጋ መሆኑን ጠቁመዋል፣ ሳይድ እና ሌሎችም።45ላኬዝ በገለልተኛ የፒኤች ሁኔታዎች ውስጥ የበለጠ የተረጋጋ መሆኑን አሳይቷል። ሆኖም፣ ከሴሬና ዩኒኮለር የተገኘው ላኬዝ በአልካላይን ሁኔታዎች (pH 9.0) መረጋጋት አሳይቷል።46.የተጠኑት ላካዎች በሰፊ የፒኤች ክልል ውስጥ ከፍተኛ መረጋጋት አሳይተዋል። ይህ ለኢንዱስትሪ አፕሊኬሽኖች አስፈላጊ ባህሪ ሊሆን ይችላል።
አንዳንድ የብረት አየኖች በኢንዛይም እንቅስቃሴ ላይ የማነቃቂያ እና የመከልከል ተፅእኖ ስላላቸው፣ በኢንዛይም እንቅስቃሴ ላይ ያላቸው ተጽእኖ በኢንዱስትሪ አተገባበር ውስጥ ግምት ውስጥ መግባት አለበት። ይህ ወሳኝ ነው ምክንያቱም የብረት አየኖች የተለመዱ የአካባቢ ብክለትዎች በመሆናቸው ከሴሎች ውጭ ያሉ ኢንዛይሞችን መረጋጋት እና ውህደት ሊነኩ ይችላሉ።47ከ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 በላክሴስ ላይ የበርካታ የብረት አየኖች ተጽእኖ ለመመርመር፣ ተጓዳኝ ሙከራዎችን አድርገናል። በስእል 4 ላይ እንደሚታየው፣ ጥቅም ላይ የዋለው የብረት አይነት ላይ በመመስረት፣ ከ2.5 mM ወደ 10 mM የብረት አየኖችን ክምችት መጨመር የኢንዛይም ተግባርን አሉታዊ ተጽዕኖ አሳድሯል። ለምሳሌ፣ኤምግ²⁺ , ኮ²⁺ , Zn²⁺እናኩ²⁺የኢንዛይም እንቅስቃሴን ማነቃቃት እና ማነቃቃት ይችላል፣ና⁺ , ኤምኤን²⁺ , ካ²⁺እናኬ⁺የኢንዛይም እንቅስቃሴን ሊገታ ይችላል። በ10 mM ክምችት፣ Cu²⁺ እና Mg²⁺ አየኖች ከ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 የላክሴ እንቅስቃሴን በጣም ኃይለኛ አነቃቂዎች ነበሩ፣ ይህም በግምት 34% እና 20% የማግበር ደረጃን ይሰጣል። ሆኖም ግን፣ በ10 mM ክምችት፣ Ca²⁺ አየኖች የላክሴ እንቅስቃሴን በጣም ኃይለኛ አጋቾች ሲሆኑ የኢንዛይም እንቅስቃሴን በግምት 60% ቀንሰዋል።
የብረት አየኖች በፕሌሮተስ ኦስትሬተስ NRC 620 ላኬዝ እንቅስቃሴ ላይ ያላቸው ተጽእኖ። ላኬሱ በ2.5 mM እና 10 mM ክምችት ውስጥ የተለያዩ የብረት አየኖችን በያዘው ሶዲየም ፎስፌት ቋት (0.05 M፣ pH 7.0) ውስጥ ለ10 ደቂቃዎች ታፍኗል። ከዚያም ምላሹ የተጀመረው በንጥረ ነገር (ABTS) በመጨመር ሲሆን ከዚያ በኋላ አንጻራዊ እንቅስቃሴው ተለካ።
ውጤቶቻችን ከሌሎች ደራሲያን ጋር የሚጣጣሙ ናቸው፤ እነሱም Mg²⁺ እና Cu²⁺ የ*Trametes polyzona* WRF03³ እንቅስቃሴን ያሻሽላሉ። Castaño et al.⁴⁸ ከ*Xylaria* sp. የሚገኘው ላኬዝ በተወሰነ ደረጃ በመዳብ አየኖች (Cu²⁺) እንደሚነቃቃ አረጋግጠዋል። በተጨማሪም፣ ፎውታንፋር et al.⁴⁹ እና Si et al.⁵⁰ በቅደም ተከተል ከ*Paraconiothyrium variabile* እና *Trametes pubescens* ባሉ ላኬዝዎች ላይ ተመሳሳይ ጥናቶችን አካሂደዋል። የዚህ ኢንዛይም አይነት II የመዳብ ማያያዣ ቦታ (T2) በተወሰነ ክምችት በCu²⁺ ሊሞላ ይችላል፣ ይህም በከፍተኛ Cu²⁺³⁹ ክምችት ላይ የላኬዝ እንቅስቃሴን ማነቃቃትን ሊያብራራ ይችላል። ነጭ የበሰበሱ የፈንገስ ላካዎች በርካታ የመዳብ አቶሞችን የያዙ ኦክሲዳሶች ስለሆኑ፣ የመዳብ አየኖች በላክሴ እንቅስቃሴ ላይ የሚያሳድሩት ተጽዕኖ የተለያዩ እና ከማነቃቂያ እና ከመከልከል እስከ ገለልተኛ ድረስ ይለያያል።⁵¹ በተቃራኒው፣ ዙ እና ሌሎችም. [52]ሪፖርት አድርጓልኩ²⁺የታይዋን የከርሰ ምድር ተርማይት (ኦዶንቶተርምስ ፎርሞሳነስ) የላኬዝ እንቅስቃሴን አግዷል። ሆኖም ግን፣ የሴሬና ስፒ. HYB07 ላኬዝ[53]እና ክሊቶሳይቤ ማክሲማ[54]በመዳብ አየኖች አልተጎዱም።
የንዑስ ክፍል ልዩነት በኪነቲክ መለኪያዎች (ኪሜ እና ቪማክስ) ተወክሏል፤ የንዑስ ክፍል ከኤንዛይም ጋር ያለው ትስስር በጠነከረ ቁጥር የኪሜ እሴት ዝቅ ይላል እና የንዑስ ክፍል ልዩነት ከፍ ይላል።3,21,55ከ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 የሚገኘው የላኬዝ ኪኔቲክ መለኪያዎች (ኪሜ እና ቪማክስ) የLineweaver-Burk ሴራ በመቅረጽ GraphPad Prism 6.0 ሶፍትዌርን በመጠቀም ተወስነዋል (ምስል 5)። ABTSን እንደ ንጣፍ ሲጠቀሙ ውጤቶቹ 1.99 mM እና 16217 μmol ነበሩ።ደቂቃ⁻¹ L⁻¹፣በቅደም ተከተል። ኤልሳይድ እና ሌሎችም።21የ ABTS ኦክሳይድ የ Km እሴቶች በቅደም ተከተል 0.1 mM እና 0.064 mM መሆናቸውን ሪፖርት አድርጓል፣ ይህም ለ ABTS የ Lac A እና Lac B isoenzymes ከፍተኛ ትስስር እንዳለው ያሳያል። በተጨማሪም፣ የ Vmax እሴቶች 0.182 μmol ነበሩ።ደቂቃ⁻¹እና 0.603 μሞልደቂቃ⁻¹በቅደም ተከተል። የተገኘው የኪ.ሜ እሴት ከትራሜትስ ፖሊዞና WRF03 (8.66 mM) ያነሰ ነበር፤ በተጨማሪም የቪማክስ እሴታቸው (1429 mmol ደቂቃ⁻¹) እንዲሁ ነበርዝቅተኛABTSን እንደ ንጣፍ ሲጠቀሙ።33 በተመሳሳይ፣ የሌንቲነስ ስኩዋሮሱለስ MR13 እና ትሬሜትስ ስፒ. AH28-2 የላካዝ ክምችቶች በቅደም ተከተል 0.0714 mM እና 0.025 mM ነበሩ፣ እና የVmax እሴቶች 0.0091 mM ደቂቃ−1 እና 0.67 mM ደቂቃ−1 mg−1 ነበሩ (ከABTS አንፃር)በቅደም ተከተል.56,57
የ ABTS ክምችት ከ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ባለው የላኬዝ እንቅስቃሴ ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ ተመርምሮ፣ እና የመጀመሪያው የምላሽ ፍጥነት ከ ABTS ክምችት ጋር ያለው የተገላቢጦሽ መስመርዌቨር-ቡርክ ሴራ ተቀርጿል። የ ABTS የተለያዩ ክምችቶች (0.025–3.0 mM) ያለው የላኬዝ ኦክሲዴሽን ምላሽ በ pH 4.5 ተለክቷል፣ ይህም የኪነቲክ መለኪያዎችን (Vmax እና Km) ለመወሰን ነው። የሚካኢሊስ-ሜንተን የኪነቲክ ቋሚዎች የተሰላው የምላሽ ፍጥነት እና የንዑስ ክፍል ክምችት በተገላቢጦሽ መስመርዌቨር-ቡርክ ሴራ በመጠቀም ነው። የኪነቲክ ቋሚዎች የተሰላው ከLineweaver-Burk ሴራ ሲሆን GraphPad Prism 6.01 ሶፍትዌርን በመጠቀም ነው።
እንደ ፔክታኔዝ፣ ፔክቲክ ንጥረ ነገሮችን በሃይድሮላይዝ በማድረግ viscosity እና ድፍርስነትን ይቀንሳሉ። መዋቅራዊ ፖሊሶካካርዴስን በብቃት ይሰብራሉ እና ብዙውን ጊዜ እንደ ሴሉላሴስ እና ሄሚሴሉላሴስ ካሉ ሌሎች ኢንዛይሞች ጋር በማጣመር ምርትን እና ግልጽነትን ለማሻሻል ጥቅም ላይ ይውላሉ። ሆኖም፣ ፔክታኔዝ በተለይ እንደ ፖም እና ወይን ጭማቂ ባሉ ጭማቂዎች ውስጥ ለድፍርስነት እና ለኦክሳይድ ቡናማነት ዋና አስተዋፅዖ የሚያደርጉ የፊኖሊክ ውህዶችን ኢላማ አያደርጉም።58በአንጻሩ፣ ላካዎች የፊኖሊክ ውህዶችን ኦክሳይድ በማነሳሳት፣ በሴድሜሽን ወይም በማጣራት ሊወገዱ ወደሚችሉ ትላልቅ፣ የማይሟሙ ሞለኪውሎች ፖሊመር ያደርጋሉ። ይህ ዘዴ ግልጽነትን ከማሻሻል ባለፈ በፊኖሊክ ውህዶች ምክንያት የሚከሰተውን ኦክሲዴቲቭ ቡኒ የመሆን እድልን በመቀነስ የጭማቂውን የመደርደሪያ ሕይወት ያራዝማል። በተጨማሪም፣ በላካዝ ላይ የተመሰረቱ የማብራሪያ ሂደቶች በቀላል የማቀነባበሪያ ሁኔታዎች (pH 3.5–5.5፣ የሙቀት መጠን 25–40 °C) ሊከናወኑ ይችላሉ፣ ይህም የአመጋገብ ወይም የኦርጋኖሌፕቲክ ባህሪያቸውን ሳይጎዳ ለስለስ ያሉ ጭማቂዎች ተስማሚ ያደርጋቸዋል።59ጥናቶች እንደሚያሳዩት የፔክቴኔዝ ሕክምና ጭማቂውን በ1-2 ሰዓታት ውስጥ ግልጽ ማድረግ የሚችል ሲሆን የላኬዝ ሕክምና ደግሞ የፊኖሊክ ውህዶችን ሙሉ በሙሉ ለመቀነስ ረዘም ያለ የምላሽ ጊዜ (ከ3-6 ሰዓታት) ይፈልጋል። ሆኖም፣ ይህ ሂደት ኢንዛይሙን በማገድ ወይም ላኬዝን ከሜካኒካል የማብራሪያ ዘዴዎች ጋር በማጣመር ሊሻሻል ይችላል።60በዚህ ጥናት፣ የድፍድፍ ማውጣት የኢንዛይም ፕሮፋይል ከፍተኛ የላክሴስ እና የα-አሚላሴ እንቅስቃሴዎችን አሳይቷል፣ የፔክቴኔዝ እና የክሲላኔዝ እንቅስቃሴዎች እጅግ በጣም ዝቅተኛ ነበሩ፣ እና የሴሉላሴ እንቅስቃሴ አልተገኘም። ስለዚህ፣ የድፍድፍ እና የፊኖሊክ ይዘት መቀነስ በዋናነት የላክሴስ ተግባር ምክንያት ሲሆን፣ የድፍድፍ ለውጥ በከፊል በአሚላሴ ተግባር ምክንያት ሊሆን ይችላል።
ሠንጠረዥ 1 አዲስ የተጨመቀ የፖም ጭማቂ እና በላኬዝ የታከሙ ናሙናዎች የፊዚዮኬሚካላዊ መለኪያዎችን ያሳያል። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት አዲስ የተጨመቀ የፖም ጭማቂ (71.59%) ከላኬዝ የታከሙ ናሙናዎች (87.34%) ያነሰ ነው። እነዚህ ውጤቶች ከፒልኒክ እና ኦሬንጅ ግኝቶች ጋር የሚጣጣሙ ናቸው።61በፍራፍሬ ማቀነባበሪያ ውስጥ ኢንዛይሞችን መጠቀም የፍራፍሬ ምርትን ሊጨምር፣ ማጣሪያን ሊያሻሽል እና ከፍተኛ ጥራት ያለው እና ጥርት ያለ ጭማቂ ለማግኘት እንደሚችል አመልክቷል። የጭማቂ ምርት መጨመር በዋናነት በጭማቂው ውስጥ የሚሟሟ ስኳር ይዘት መጨመር ምክንያት ነው። ፍራፍሬዎች ኢንዛይማቲክ ሃይድሮላይዝስ በሚያደርጉበት ጊዜ፣ በምርቱ የሴል ግድግዳዎች ውስጥ ያሉት ሜሶግል እና ፔክቲን ይደመሰሳሉ እና እንደ ገለልተኛ ስኳር እና አሲዶች ያሉ የሚሟሟ ንጥረ ነገሮች ይለወጣሉ።62.በኢንዛይም የታከመው የፖም ጭማቂ የፒኤች ዋጋ ከቁጥጥር ቡድኑ በእጅጉ ያነሰ ነበር (P < 0.05)፣ እና የሁለቱም ቡድኖች የፒኤች ዋጋ በማከማቸት ወቅት በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል (ሠንጠረዥ 1)። እነዚህ ውጤቶች ከማርክ እና ሌሎች ጋር የሚጣጣሙ ናቸው።63ከሙቀት ሕክምና በኋላ ከተከማቸ በኋላ የካሼው የፍራፍሬ ጭማቂ ፒኤች እንደቀነሰ አስተውለዋል። በኢንዛይም ሕክምና በኋላ የፔክቲን መበላሸት እና የጋላክቱሮኒክ አሲድ መፈጠር በማከማቻ ጊዜ የፒኤች መጨመርን ሊያስከትሉ ይችላሉ። በኢንዛይም የታከሙ ናሙናዎች ፒኤች በማከማቻ ጊዜ ሁሉ ከ4.05 እስከ 4.31 መካከል የቆየ ሲሆን ያልታከመ የፖም ጭማቂ ፒኤች ደግሞ ከ4.12 እስከ 4.33 መካከል ይገኛል።
ያልታከሙ እና በላኬዝ የታከሙ ናሙናዎች አጠቃላይ የአሲድነት መጠን (TA) የማከማቻ ጊዜ እየጨመረ ሲሄድ እየቀነሰ የመጣ አዝማሚያ አሳይቷል (ሠንጠረዥ 1)። የአሲድነት መቀነስ የተከሰተው ኦርጋኒክ አሲዶች ወደ ካርቦሃይድሬት ወይም ኢንዛይማቲክ ግብረመልሶች በመቀየር እንዲሁም በጭማቂ ማከማቻ ወቅት ኦክሳይድ በመደረጉ ምክንያት ነው።64የቁጥጥር አፕል ጭማቂ እና በኢንዛይም የታከሙ ናሙናዎች አጠቃላይ የአሲድነት መጠን ከሌሎች ጭማቂዎች ያነሰ ነበር (የእንጆሪ ጭማቂ 0.9%፣ የፕለም ጭማቂ 2.2%፣ የኩምኳት ጭማቂ 1.0%፣ የአፕሪኮት ጭማቂ 2.4%፣ የብርቱካን ጭማቂ 0.8%)፣ ነገር ግን ከሌሎች ጭማቂዎች (ለምሳሌ የፒር ጭማቂ 0.3%) ጋር ተመሳሳይ ነው።62አዲስ በተጨመቀ የፖም ጭማቂ ላይ እነዚህ ልዩነቶች የሚከሰቱት እንደ የእድገት ሁኔታዎች፣ የጄኔቲክ ምክንያቶች፣ የብስለት ደረጃ እና የማቀነባበሪያ ዘዴዎች ባሉ የተለያዩ ምክንያቶች ምክንያት ሊሆን ይችላል።65የቁጥጥር እና የላኬዝ-የተከተፈ የፖም ጭማቂ አጠቃላይ የአሲድነት መቀነስ ከሲንግ እና ሌሎችም ጋር የሚጣጣም ነው።66ከ74 ቀናት ማከማቻ በኋላ የጂን ኑኦ የፖም ጭማቂ አጠቃላይ የአሲድነት መቀነስን በተመለከተ። በሌላ በኩል፣ ኦሽሚያንስኪ እና ዎጅዲሎ67የባህላዊ የማብራሪያ ዘዴዎችን ውጤት ሲያጠኑ በአፕል ጭማቂ አሲድነት ላይ ምንም ዓይነት ጉልህ ለውጥ አላገኘም።
በሰንጠረዥ 1 ላይ የቀረቡት ውጤቶች እንደሚያሳዩት በላኬዝ የታከመው የፖም ጭማቂ አጠቃላይ የሚሟሟ ጠጣር (TSS) ዋጋ ከህክምና ካልተደረገለት ናሙና የበለጠ ነበር። እነዚህ ውጤቶች ከታተሙ ጥናቶች ጋር የሚጣጣሙ ናቸው።. 68በተጨማሪም፣ ሠንጠረዥ 1 የሚያሳየው የቁጥጥር ፖም ጭማቂ ቡድን የTSS ዋጋ በመጀመሪያው ጊዜ 9.58 እንደነበር እና በማከማቻ ጊዜው መጨረሻ 11.05 ላይ እንደደረሰ ነው። እነዚህ እሴቶች በሃሚድ እና ባልደረቦቻቸው ከተዘገቡት ትኩስ የፖም ጭማቂ የTSS እሴቶች ያነሱ ናቸው።. 69(በቅደም ተከተል 11.2 እና 11.80)። በላኬዝ የታከሙ የፖም ጭማቂ ናሙናዎች የTSS ዋጋ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል፣ ከ11.23 ጀምሮ እና በ4°ሴ ለሁለት ሳምንታት ከተከማቸ በኋላ 12.93 ደርሷል (ሠንጠረዥ 1)። በሲትረስ ፍራፍሬዎች፣ ሎሚዎች እና ጣፋጭ ብርቱካን ውስጥም በማከማቻ ወቅት በTSS ላይ ተመሳሳይ ጭማሪ ታይቷል። በማከማቻ ጊዜ አጠቃላይ የሚሟሟ ጠጣሮች (TSS) መጨመር የፖሊካካርዴስ (ስታርች) ወደ ሞኖሳካካርዴስ (ስኳር) ሃይድሮሊሲስ፣ በጭማቂ ድርቀት ምክንያት ያለው ክምችት መጨመር እና በጭማቂው ውስጥ ያለው ፔክቲን ወደ የሚሟሟ ጠጣሮች መበላሸት ምክንያት ሊሆን ይችላል። በጠቅላላ የሚሟሟ ጠጣሮች (TSS) መጨመር ምናልባት የሚሟሟ ስኳር መጨመር ሊሆን ይችላል፣ ይህም በፔክቲን ወይም ሴሉላዝ በቅደም ተከተል ወደ የሚሟሟ ስኳር በመቀየር ወይም በስታርች ወደ ስኳር ሃይድሮሊሲስ ምክንያት ሊፈጠር ይችላል፣ እንደ ሃመድ እና ሌሎች ዘገባ።69.ላኬዝ በአፕል ጭማቂ ባህሪያት ላይ የሚያሳድረው ተጽእኖ በእይታ ሊታይ ይችላል፣ ምክንያቱም ላኬዝ በተደረገለት የፖም ጭማቂ ከህክምና ካልተደረገለት ጭማቂ የተሻለ የመፍሰስ አቅም እና ዝቅተኛ የመወጠር ችሎታ ስላለው። ይህ ምልከታ በሰንጠረዥ 1 ውስጥ ተመዝግቧል፤ በኢንዛይም የታከመው ናሙና viscosity 1.87 cP ሲሆን የቁጥጥር ናሙናው viscosity 2.95 cP ነበር። ይህ ጉልህ የሆነ የviscosity መቀነስ የፔክቲን መሰል ንጥረ ነገሮች ከፍተኛ የውሃ የመያዝ አቅም እና የተቀናጀ የኔትወርክ መዋቅር በመፈጠሩ ምክንያት ሊሆን ይችላል።
በዚህ ጥናት ውስጥ፣ ላኬዝ በአፕል ጭማቂ ቡናማ ኢንዴክስ (BI) ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ በ420 nm ላይ ያለውን የመምጠጥ አቅም በስፔክትሮፎቶሜትር በመለካት ተመርምሯል። ውጤቶቹ በሰንጠረዥ 1 ላይ ይታያሉ። በማከማቻ ጊዜ፣ በታከሙትም ሆነ ባልታከሙ ቡድኖች ውስጥ የአፕል ጭማቂ ናሙናዎች BI ቀስ በቀስ እየጨመረ የመጣ አዝማሚያ አሳይቷል። BI የቡኒንግ ደረጃን የሚያንፀባርቅ ሲሆን እንደአስፈላጊየኢንዛይም እና የኢንዛይም ያልሆኑ የብራውኒንግ ግብረመልሶች አመላካች። በማከማቻ ጊዜ የመምጠጥ መጠኑ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል (P < 0.05)። በማከማቻው መጨረሻ ላይ፣ኤ420በቁጥጥር እና በኢንዛይም የታከሙ ቡድኖች ውስጥ የፖም ጭማቂ ናሙናዎች ዋጋ በቅደም ተከተል በ217% እና በ121% ጨምሯል (ሠንጠረዥ 1)። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት የኢንዛይም ሕክምና የቡኒንግ ደረጃን በ56% ያህል ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊቀንስ ይችላል። የቤዘርራ እና ሌሎችም ውጤቶች።[19]] ከውጤቶቻችን ጋር የሚጣጣሙ ናቸው፤ የፖም ጭማቂን ለማጥራት የላኬዝ-ግሉታራሌዴይድ-የኮኮናት ፋይበርን ተጠቅመው የመጀመሪያውን ቀለም በ61% ቀንሰዋል።
በፍራፍሬ ጭማቂዎች ውስጥ የሚገኙት ፖሊፊኖሎች በሰው አካል ላይ አወንታዊ የአመጋገብ እና የህክምና ተፅእኖዎች ቢኖራቸውም፣ ከፕሮቲኖች ጋር ምላሽ ሊሰጡ ይችላሉ፣ ይህም የጭማቂ ደመናማነት፣ የሴሚኒየም ወይም የድብልቅነት ስሜት ያስከትላል፣ በዚህም የምርቱን ጣዕም እና መዓዛ ይለውጣል እና የመደርደሪያ ህይወቱን ይቀንሳል።71የዚህ ጥናት ዓላማ ከፕሌሮተስ ኦስትሬተስ NRC 620 የሚገኘውን ላኬዝ በመጠቀም የፖም ጭማቂን የፊኖሊክ ውህድ ይዘት ደህንነቱ በተጠበቀ ሁኔታ መቀነስ ነበር። በሰንጠረዥ 1 ላይ የቀረቡት ውጤቶች እንደሚያሳዩት በላኬዝ የታከመ የፖም ጭማቂ አጠቃላይ የፊኖሊክ ውህድ ይዘት በ4°ሴ ከመከማቸቱ በፊት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። በተጨማሪም፣ በተጠኑት ሁለቱም ናሙናዎች ውስጥ በማከማቻ ወቅት አጠቃላይ የፊኖሊክ ውህድ ይዘትም ቀንሷል (ሠንጠረዥ 1)። በሳንድሪ እና ባልደረቦቻቸው የተደረገ ጥናት።72በኢንዛይም የታከመ የፖም ጭማቂ የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴውን እና የፊኖሊክ ውህድ ይዘቱን ማቆየት እንደሚችል አሳይቷል። ሆኖም ግን፣ በሌተራ እና ባልደረቦቻቸው የተደረገ ጥናት ውጤት።73የብርቱካን ጭማቂን በፈንገስ ላክሴስ ማከም በውስጡ ያሉትን የፊኖሊክ ውህዶች ይዘት እስከ 45% ሊቀንስ እንደሚችል ያሳያል።
የፊኖሊክ ውህዶች እንደ ፍሪ ራዲካል ስካንቪንግ፣ ነጠላ ኦክስጅንን መቀነስ እና ማጥፋት፣ የሃይድሮጂን አቶም ዝውውር እና ኤሌክትሮን ልገሳ ለፍሪ ራዲካልስ ኃይለኛ አንቲኦክሲደንትስ እንዲሆኑ የሚያደርጉ ባህሪያት እንዳላቸው ታይቷል።74ስለዚህ፣ በዚህ ጥናት፣ ላክሴስ በማቀዝቀዣ ውስጥ ለ14 ቀናት በተከማቸው የፖም ጭማቂ ላይ ያለውን የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመገምገም DPPH እና FRAP-based ዘዴዎች ጥቅም ላይ ውለዋል (ሠንጠረዥ 2)። ሁለቱም ዘዴዎች በማከማቻ ጊዜ የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ መጨመር አሳይተዋል፣ ይህም በነጻ የፊኖሊክ ውህዶች መጨመር ወይም የሜላርድ ግብረመልስ ምርቶች (MRPs) መፈጠር ምክንያት ሊሆን ይችላል፣ የሜላርድ ግብረመልስ ምርቶች ደግሞ የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ መጨመር ምክንያት ሊሆኑ ይችላሉ።75ኢንዛይማቲክ ያልሆኑ የብራውኒንግ ግብረመልሶች (የአስኮርቢክ አሲድ መበላሸት፣ የሜላርድ ግብረመልሶች እና የአሲድ-ካታላይዝድ የስኳር መበላሸትን ጨምሮ) ቡናማ ቀለሞችን (ሜላኖይዲንስ) ያመነጫሉ። መካከለኛ የአስኮርቢክ አሲድ መበላሸት ምርቶች እና የስኳር መበላሸት ምርቶች (እንደ ካርቦኒል ውህዶች ያሉ) በሜላርድ ግብረመልሶች አማካኝነት ከአሚኖ አሲዶች ጋር ምላሽ ሊሰጡ ይችላሉ።76ምንም እንኳን በማከማቻ ወቅት የፍራፍሬና የአትክልት ቀለም መቀባት በስፋት ጥናት ቢደረግም፣ ስለእነዚህ ምላሾች ያለን ግንዛቤ ውስን ነው።77ከFRAP ዘዴ ጋር ሲነጻጸር፣ በላኬዝ የታከመ የፖም ጭማቂ በDPPH ዘዴ በእጅጉ ያነሰ የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ አሳይቷል (ሠንጠረዥ 2)፣ እና የሁሉም ናሙናዎች የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ የማከማቻ ጊዜ እየጨመረ ሲሄድ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። በዚህ ጥናት ውስጥ የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴን ለመወሰን ሁለት የተለያዩ ዘዴዎች ጥቅም ላይ ውለዋል ምክንያቱም መርሆቻቸው የተለያዩ ናቸው። የዲፒኤች ዘዴ ነፃ ራዲካልስን የማግለል ችሎታን ይለካል፣ የFRAP ዘዴ ደግሞ የብረት አየኖችን የመቀነስ ችሎታን ይለካል። ስለዚህ፣ የተጠኑትን ናሙናዎች የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴ በተሻለ ለመረዳት የፀረ-ኦክሲዳንት እንቅስቃሴን ለመወሰን በርካታ ዘዴዎችን መጠቀም ይመከራል።78
የዚህ ጥናት ቁልፍ ግኝቶች አንዱ *Pleurotus ostreatus* laccase NRC 620 በ70°ሴ እና pH 3.0 ጥሩ እንቅስቃሴን ያሳያል። እንደ *Trametes versicolor* እና *Ganoderma lucidum* laccase ያሉ ጭማቂን ለማጣራት በተለምዶ ከሚጠቀሙባቸው ሌሎች የፈንገስ ላካሴዎች ጋር ሲነጻጸር፣ *P. ostreatus* NRC 620 ከፍ ያለ የሙቀት መረጋጋት እና የበለጠ አሲዳማ ፒኤች ያሳያል። ከ*Trametes versicolor* እና *Ganoderma lucidum* የተገኙ ላካሴዎች በተለምዶ ከ50-60°ሴ ባለው ክልል ውስጥ እና በ3.5 እና 5.0 መካከል ባለው የፒኤች እሴቶች ጥሩ እንቅስቃሴ ያሳያሉ። ይህ ልዩነት በተለይም ዝቅተኛ የፒኤች እሴቶች መረጋጋት ወሳኝ በሆነባቸው አሲዳማ ጭማቂዎች ላይ የተሻሻለ የጭማቂ ማጣሪያ ውጤታማነትን ሊያመጣ ይችላል። የ*P ልዩ ባህሪ ከሌሎች የተጠኑ የፈንገስ ላካሴዎች ጋር ሲነጻጸር፣ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ይበልጥ አስቸጋሪ በሆኑ ሁኔታዎች ውስጥ ውጤታማ በሆነ መንገድ የመሥራት ችሎታን ያሳያል። ከፍተኛ የሆነ ተስማሚ የእንቅስቃሴ የሙቀት መጠን በኢንዱስትሪ አተገባበር ላይ እንደ ፈጣን የምላሽ መጠን እና የማይክሮባላዊ ብክለት መቀነስ ያሉ ሊሆኑ የሚችሉ ጥቅሞችን ያሳያል። ለብዙ ጭማቂዎች አሲዳማ ባህሪ ተስማሚ የሆነው ዝቅተኛ የፒኤች መጠን በጭማቂ ማጣሪያ ሂደቶች ውስጥ ጠቃሚ ሊሆን ይችላል። እነዚህ ውጤቶች ለትላልቅ አተገባበር ተጨማሪ ምርምርን ያረጋግጣሉ፣ ይህም *Pleurotus ostreatus* NRC 620ን ከባህላዊ የፈንገስ ላኬዝ ምንጮች አዋጭ አማራጭ ያደርገዋል። ከቀደሙት ጥናቶች ጋር ሲነጻጸር፣ በጣም ጥሩው የሙቀት መጠን 60°ሴ እና በጣም ጥሩው ፒኤች 3.0 መሆኑን ደርሰንበታል። ለ80 ደቂቃዎች በ60°ሴ ምላሽ ከሰጠ በኋላ፣ *Ganoderma lucidum* lacase ተይዟል።46% የሚሆነው እንቅስቃሴ።79 እንደ ኩርኒያዋቲ እና ኒሴል ገለጻ80, *ጋኖደርማ ሉሲደም* ኢንዛይሞች በ25°ሴ እና በፒኤች እሴቶች ከ5.0 እስከ 8.0 ባለው ክልል ውስጥ እጅግ በጣም ጥሩ እስከ መካከለኛ መረጋጋት ያሳያሉ፣ በፒኤች 6.0 እና በሙቀት መጠን ከ10 እስከ 30°ሴ ባለው ክልል ውስጥ። በዚህ ጥናት፣ ለ*ፕሌሮተስ ኦስትሬተስ* የኢንዛይም እንቅስቃሴ በጣም ጥሩው ፒኤች እና የሙቀት መጠን በቅደም ተከተል 3.0 እና 70°ሴ እንደነበር ደርሰንበታል። ለሁለት ሰዓታት በ40°ሴ እና 50°ሴ ከተቀቀለ በኋላ፣ ኢንዛይሙ በቅደም ተከተል 68.33% እና 59.61% የእንቅስቃሴውን ይዞ ቆይቷል። በተጨማሪም፣ ፕሌሮተስ ኦስትሬተስ NRC 620 ላክሴዝ ከ50°ሴ እስከ 80°ሴ ባለው ሰፊ የሙቀት ክልል ውስጥ ከፍተኛ እንቅስቃሴ አሳይቷል፣ ከፍተኛ እንቅስቃሴ (69%–98%) ሊደርስ ተቃርቧል፣ ከፍተኛው እንቅስቃሴ ደግሞ በ70°ሴ ታይቷል።
ለማጠቃለል ያህል፣ በማይንቀሳቀስ ሁኔታ የተገኘው የኦይስተር እንጉዳይ ላኬዝ NRC620 በተለያዩ የፒኤች እና የሙቀት ሁኔታዎች ውስጥ ጥሩ እንቅስቃሴ እና መረጋጋት አሳይቷል፣ ይህም ከሌሎች የኢንዛይም ምንጮች ጋር ሲነጻጸር የላቀ መረጋጋትን ያሳያል። የ10 mM MgSO₄ እና CuSO₄ መጨመር የኢንዛይም እንቅስቃሴን በቅደም ተከተል በግምት 21% እና 35% ጨምሯል። ወደ ፖም ጭማቂ ሲሰራ፣ ኢንዛይሙ የፒኤች እና የቪስኮሌሽን መጠን ቀንሷል፣ የፊኖሊክ ይዘት ደግሞ በማከማቸት ወቅት በትንሹ ብቻ ቀንሷል።
ውጤቶቹ በምግብ ኢንዱስትሪ ውስጥ በተለይም በመጠጥ ማጣሪያ ረገድ የላኬዝ አቅምን ያረጋግጣሉ። በተለይ የፊኖሊክ ውህዶችን በመከፋፈል፣ ላኬዝ ብክነትን ከመቀነስ እና ግልጽነትን ከማሻሻል ባለፈ የፍራፍሬ ጭማቂዎችን ጥራት በመለስተኛ የአሠራር ሁኔታዎች ውስጥ ይጠብቃል። እንደ ጄልቲን፣ ቤንቶኔት እና ሲሊካ ጄል ካሉ ባህላዊ የማጥራት ወኪሎች በተለየ መልኩ ላኬዝ ከመጠጥ ቆሻሻ አያመጣም ወይም ደስ የሚሉ መዓዛዎችን አያስወግድም፣ ይህም የበለጠ ለአካባቢ ተስማሚ እና ዘላቂ አማራጭ ያደርገዋል። በተጨማሪም፣ ከሌሎች ኢንዛይሞች እና የማጣሪያ ዘዴዎች ጋር ሲነጻጸር፣ ላኬዝ የምርት ጥራትን ሳይጎዳ የታለመ እና ወጪ ቆጣቢ መፍትሄ ይሰጣል።
ኪዮሙሂምቦ፣ ኤችዲ እና ብሪንክ፣ ኤችጂ። የመዳብ የያዙ ላካዎች አፕሊኬሽኖች እና የማንቀሳቀስ ስልቶች፤ ግምገማ። ሄሊዮን 9፣ e13156 (2023)።
የፖስታ ሰዓት፡- ታህሳስ-15-2025